實(shí)驗(yàn)室常用耗材的使用注意事項(xiàng)要知道

一液相色譜柱

關(guān)于色譜柱的安裝、維護(hù)、保存以及由色譜柱導(dǎo)致的這樣那樣的色譜故障也是一門學(xué)問(wèn)。

高效液相色譜柱的正確使用包含：加裝保護(hù)柱，過(guò)濾流動(dòng)相和樣品，凈化樣品，避免過(guò)高的柱壓，注意溫度和酸堿度，正確及時(shí)的沖洗等。

關(guān)于液相色譜柱的使用注意事項(xiàng)，一般有以下6個(gè)要點(diǎn)： 

1.加裝保護(hù)柱

保護(hù)柱的作用是過(guò)濾掉來(lái)自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾"同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污染,因此,加裝保護(hù)柱是必要的,特別是在分析中藥、中成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時(shí)更是保護(hù)分析柱的措施。

保護(hù)柱填料應(yīng)與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護(hù)柱屬消耗品,經(jīng)過(guò)一定次數(shù)的樣品分析(50～100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時(shí),應(yīng)考慮更換保護(hù)柱。

2.過(guò)濾流動(dòng)相和樣品

流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有機(jī)溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過(guò)色譜柱的流動(dòng)相均應(yīng)過(guò)濾,但在實(shí)際操作上應(yīng)視具體情況而有所區(qū)別:當(dāng)有機(jī)溶劑用色譜純級(jí),水用石英亞沸水或其它超純水時(shí),在能確保水和有機(jī)溶劑的質(zhì)量且沒(méi)有受到污染時(shí),過(guò)濾并無(wú)更多實(shí)際意義。

當(dāng)流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí),則過(guò)濾是必要的,如前所述,當(dāng)緩沖溶液放置一段時(shí)間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過(guò)48 h,冬季一般不超過(guò)一周)后,在使用前還應(yīng)重新過(guò)濾。

所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)濾膜過(guò)濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。

裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過(guò)載而起不到過(guò)濾作用。

3.凈化樣品

當(dāng)樣品中含有對(duì)色譜柱有損害的化學(xué)成分,如產(chǎn)生性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機(jī)分子和強(qiáng)吸附性物質(zhì),以及可能對(duì)柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團(tuán)離子。在進(jìn)樣前應(yīng)盡可能對(duì)樣品進(jìn)行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。

4.避免過(guò)高柱壓

雖然高效液相色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000 p si (磅/平方英寸) ,但過(guò)高及過(guò)大的壓力變化均會(huì)縮短色譜柱的壽命,避免的方法是

(1)柱壓過(guò)高時(shí),盡可能采用較小的流速,以不超過(guò)柱最大允許壓力的一半為宜。

(2)當(dāng)流速較大時(shí),應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。

(3)使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí),進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過(guò)20%的壓力沖擊會(huì)很快使柱報(bào)廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時(shí),柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。

5.注意溫度和酸堿度

一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱最高使用溫度不超過(guò)60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動(dòng)相pH接近使用限度時(shí),更應(yīng)降低使用溫度。

溫度過(guò)高會(huì)加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而使填料性質(zhì)改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。

目前的鍵合硅膠色譜柱標(biāo)示的pH適用范圍可達(dá)2～10,但在實(shí)際使用時(shí)應(yīng)避免pH條件,特別是在偏堿性的條件(pH≥8)下使用 ,如必須要在pH條件下使用時(shí),可通過(guò)以下方法避免柱損害:

(1)在泵和進(jìn)樣閥之間加裝預(yù)柱(飽和柱)來(lái)飽和流動(dòng)相

(2)降低使用溫度

(3)檢驗(yàn)完畢后立即用與所使用的流動(dòng)相互相混溶的“溫和溶劑"*清洗。

6.正確及時(shí)的沖洗

開(kāi)始試驗(yàn)前,應(yīng)了解柱中當(dāng)前是何種溶劑。對(duì)于新色譜柱,如無(wú)特殊說(shuō)明均為評(píng)價(jià)報(bào)告中所用流動(dòng)相。柱中當(dāng)前溶劑一定要與分析樣品所用流動(dòng)相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過(guò)渡。

二氣相色譜柱

為了避免柱后被沖開(kāi)和柱內(nèi)擔(dān)體塌陷,通氣時(shí)緩慢升至所需柱前壓。為避免檢測(cè)器被污染,老化時(shí)請(qǐng)不要將色譜柱和檢測(cè)器相連。當(dāng)柱箱溫度高于室溫時(shí), 載氣中少量氧會(huì)損壞色譜柱內(nèi)的固定相, 載氣必須采用脫氧管進(jìn)一步脫氧(建議所用載氣中氧氣含量不要超過(guò)1ppm) 。

安裝色譜柱時(shí), 產(chǎn)品牌號(hào)應(yīng)面向操作者, 左側(cè)為色譜柱的進(jìn)樣口。拆卸色譜柱時(shí), 應(yīng)先將柱溫降至室溫, 然后再關(guān)載氣 。

使用毛細(xì)管色譜柱時(shí)的注意事項(xiàng)

毛細(xì)管色譜柱在氣相色譜儀分析中是一個(gè)核心部分,正確使用毛細(xì)管色譜柱對(duì)氣相色譜儀分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和延長(zhǎng)毛細(xì)管色譜柱的使用壽命至關(guān)重要:載氣必須采用脫氧管進(jìn)行進(jìn)一步脫氧 (建議所用載氣中氧氣含量不要超過(guò)PPM) ;拆卸色譜柱時(shí)先要將柱溫降至室溫,然后再關(guān)載氣;

安裝完色譜柱后, 要先通載氣將柱內(nèi)的空氣置換干凈后再升柱溫;儀器載氣管路使用金屬管,使用前一定要進(jìn)行檢漏;請(qǐng)?jiān)诓蛔龇治鰰r(shí)將柱溫降到100度以下,可延長(zhǎng)色譜柱使用壽命;

三SPE固相萃取小柱

SPE固相萃取柱適合不同體積樣品處理，SPE小柱也可根據(jù)客戶的需求加工定制。自產(chǎn)的SPE小柱回收率高、流速適中、吸附量大、重現(xiàn)性好、性價(jià)比高、比國(guó)內(nèi)同類產(chǎn)品有更高的重復(fù)性和一致性。在環(huán)境水體污染物的萃取、生命科學(xué)、食品農(nóng)殘和獸殘以及動(dòng)植物提取等方面可以達(dá)到的效果。

SPE固相萃取柱的容量是指固相萃取柱填料的吸附量。對(duì)于以硅膠為基質(zhì)的固相萃取柱，其容量一般在1~5 mg/100 mg，也就是柱容量是填料質(zhì)量的1%~5%。而鍵合硅膠離子交換吸附劑填料的容量以meq/g表示，即每克填料的容量為X毫克當(dāng)量。這類填料的容量通常在0.5~1.5 meq/g。SPE固相萃取柱為樣品分析前的儲(chǔ)備提供快速和有效的純化和濃縮，為使這些產(chǎn)品獲得的分析結(jié)果需要注意以下四個(gè)方面：

1、樣品的物理和化學(xué)特征：影響因素如被分析物相對(duì)與介質(zhì)的極性，帶電荷的官能團(tuán)，溶解性，分子量，等等，決定了被分析物與填充床的結(jié)合強(qiáng)度。

2、選擇適當(dāng)?shù)谋Ａ舴椒ǎ嚎赡艿姆椒ㄓ袃煞N：第一，被分析物不保留與填充床，而干擾物保留，如此純化了樣品。第二，被分析物保留與填充床，而干擾物不保留，或者在樣品洗脫前先從填充床上洗脫。當(dāng)樣品需要濃縮時(shí)，常用的方法為第二種方法。

3、選擇適當(dāng)?shù)奶畛淞虾吞畛浯泊笮。翰煌奶盍项愋吞峁┎煌倪x擇性。填料類型應(yīng)最大的利用被分析物和樣品中的干擾物的結(jié)構(gòu)差異。選擇有適當(dāng)選擇性的填料能獲得最高的回收率和最高純度的樣品和提取物。當(dāng)填充床的大小未經(jīng)優(yōu)化時(shí)，通常有回收率低的問(wèn)題。填充床太大時(shí)會(huì)導(dǎo)致洗脫不*，而填充床太小時(shí)會(huì)導(dǎo)致保留不*，兩種情況都是回收率比預(yù)期的低。

4、選擇合適的調(diào)節(jié)，沖洗和洗脫溶劑：必須注意各類溶劑相對(duì)于填料的洗脫強(qiáng)度上樣的樣品調(diào)節(jié)溶劑應(yīng)是沒(méi)有洗脫作用的“弱溶劑"，必須使用緩沖也來(lái)控制潛在的帶電荷化合物的離子化程度。沖洗溶劑應(yīng)將弱保留的干擾物洗脫，但是洗脫強(qiáng)度不應(yīng)太強(qiáng)而導(dǎo)致被分析物洗脫。洗脫溶劑的強(qiáng)度應(yīng)足夠使被分析物在較小的體積下（1-2ml）*洗脫。

化合物在溶劑中的溶解性是一個(gè)重要的參數(shù)。一種溶劑如果不溶解被分析物而溶解樣品中的干擾物，那么它是一種的沖洗溶劑，但是不能作為洗脫溶劑。

SPE固相萃取柱產(chǎn)品用途：用于樣品的預(yù)處理，通過(guò)樣品的分離，純化和濃縮，提高樣品進(jìn)行的液化、氣象分析的速度，去除雜志，延長(zhǎng)色譜設(shè)備的使用壽命，避免色譜系統(tǒng)的污染。

四液體自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶

1、樣品瓶蓋要蓋緊，如果太松的話，進(jìn)樣針穿不透樣品瓶的瓶墊而把其插入瓶?jī)?nèi)，會(huì)導(dǎo)致取樣失敗；

2、樣品瓶不要裝得過(guò)滿，一般來(lái)說(shuō)瓶?jī)?nèi)液面應(yīng)保持在瓶?jī)?nèi)三分之二高度以下。如果液面過(guò)高，進(jìn)樣體積又比較大時(shí)，密封的樣品瓶?jī)?nèi)易產(chǎn)生負(fù)壓，影響進(jìn)樣針準(zhǔn)確的抽取液體，甚至在針內(nèi)產(chǎn)生氣泡，從而導(dǎo)致進(jìn)樣重復(fù)性不好；

3、樣品寶貴或樣品量有*，可使用樣品瓶?jī)?nèi)插管或高回收率樣品瓶，也可調(diào)節(jié)取樣時(shí)樣品針尖的位置，以大限度的利用有限的樣品；

4、針尖的位置下到離瓶底只有0.5mm時(shí)，要注意使用規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的樣品瓶，避免針尖戳到瓶底，損壞進(jìn)樣針；

5、選用規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的樣品瓶，避免取樣出錯(cuò)或失敗，甚至損傷進(jìn)樣針。

五針頭過(guò)濾器

1、新的針頭過(guò)濾器必須用清潔劑清洗干凈洗凈后用高溫蒸汽殺菌、消毒、洗凈的濾器要放好，避免污染。

2、針頭過(guò)濾器使用前必須檢查配件和密封圈是否齊全，有無(wú)損壞，然后按要求把它裝好。

3、筒體的壓力表是液體壓力顯示表，如果是二級(jí)過(guò)濾，針頭過(guò)濾器壓力表指數(shù)稍少一些是正?，F(xiàn)象，使用時(shí)間越長(zhǎng)，他們的壓力會(huì)增大，流速減少，這說(shuō)明濾芯空隙大多已被堵塞，要沖洗或者更換新的過(guò)濾芯。

4、針頭過(guò)濾器的安裝時(shí)進(jìn)出口不要接反，管道濾器底板邊上的口是液體進(jìn)口處，管道接在濾芯插口的管子是干凈液體出口處。

5、濾芯插入口時(shí)，濾芯一定要垂直，插入口后壓板扣住翅片，扭緊螺絲不動(dòng)即可。接口的濾芯入口后，應(yīng)旋轉(zhuǎn)90度卡緊，這是安裝中的關(guān)鍵，如果有一點(diǎn)不小心，就會(huì)達(dá)不到密封，容易漏水，就達(dá)不到你的使用要求。

6、新的濾芯是生產(chǎn)廠家在潔凈的生產(chǎn)廠房?jī)?nèi)用塑料袋封裝的未使用切勿撕破塑料包裝，使用要求較高的濾芯，安裝好后要經(jīng)過(guò)高溫蒸汽殺菌消毒。

7、需要過(guò)濾的液體進(jìn)入時(shí)，應(yīng)打開(kāi)針頭過(guò)濾器上面的放氣開(kāi)關(guān)，讓液體充滿柱體，否則過(guò)濾效果不好。

六離心管

一、高速冷凍離心機(jī)

1.  未經(jīng)過(guò)培訓(xùn)和考核者不能使用。

2.  選擇合適的轉(zhuǎn)頭和轉(zhuǎn)速，絕不可*速使用。

3.  選擇合適的溫度，通常4℃，除有機(jī)溶劑外不要低于零下，以免冰凍，損壞離心管和轉(zhuǎn)頭。

4.  轉(zhuǎn)頭使用前必須用擦孔棒將管空擦凈，并仔細(xì)檢查有無(wú)裂痕和孔底白斑。若有，轉(zhuǎn)頭報(bào)廢。

5.  離心管內(nèi)裝載的溶液量必須合適。不銹鋼管無(wú)蓋，只能裝2/3，塑料管可裝至肩部。管蓋必須蓋嚴(yán)絕不允許漏液。空管離心會(huì)變形。塑料管使用有機(jī)溶劑必須符合規(guī)定。

6.  離心管必須成對(duì)放置，必須嚴(yán)格平衡，偏差<0.1g 。

7.  不允許無(wú)轉(zhuǎn)頭空轉(zhuǎn)，放取轉(zhuǎn)頭必須用手柄以防轉(zhuǎn)頭滑落。轉(zhuǎn)頭要輕放、卡穩(wěn)，旋下手柄時(shí)要用手扶住手柄只轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭。轉(zhuǎn)頭蓋要蓋嚴(yán)，無(wú)蓋不準(zhǔn)離心。

8.  離心時(shí)不準(zhǔn)打開(kāi)機(jī)蓋，不準(zhǔn)扒扶在離心機(jī)上，如有異常聲音和振動(dòng)時(shí)立即停機(jī)。

9.  轉(zhuǎn)頭使用后必須及時(shí)由轉(zhuǎn)頭艙中取出、擦干，用擦孔棒將管孔仔細(xì)擦凈。如有溶液溢出必須清洗干凈，擦凈轉(zhuǎn)頭艙內(nèi)凝水，開(kāi)門晾干轉(zhuǎn)頭艙。

10. 使用離心機(jī)必須預(yù)約，用后必須登記。

二、普通離心機(jī)
1. 離心前必須仔細(xì)檢查轉(zhuǎn)頭各孔內(nèi)有無(wú)異物。
2. 離心管必須仔細(xì)平衡。
3. 機(jī)艙內(nèi)若不清潔，離心管要用塑料薄膜封口。
4. 必須慢啟動(dòng)，然后加速。
5. 離心時(shí)不準(zhǔn)開(kāi)蓋。

七滴定管

滴定管使用前必須試漏。方法是：滴定管活栓不涂油脂，注水至全容量，垂直靜置15min，所滲漏的水不超過(guò)最小分度值，即可使用。

2、向滴定管注入標(biāo)準(zhǔn)液時(shí)，應(yīng)先用少量標(biāo)準(zhǔn)液把滴定管潤(rùn)洗2～3次。注入標(biāo)準(zhǔn)液至“0"刻度以上幾厘米，如是酸式滴定管，轉(zhuǎn)動(dòng)活栓使溶液急速充滿尖嘴，并不得存有氣泡；如是堿式滴定管，將乳膠管向上彎曲，擠捏管內(nèi)玻璃球，使溶液充滿膠管和玻璃尖嘴。調(diào)整滴定管內(nèi)液，使其處于“0"刻度。

3、讀數(shù)時(shí)，滴定管必須保持垂直。裝好或放出溶液后，應(yīng)靜置片刻，待附著在內(nèi)壁上的溶液流下之后再讀數(shù)。讀數(shù)者的視線必須與管內(nèi)液面的最凹點(diǎn)處于同一水平線上。標(biāo)準(zhǔn)溶液如是深色（如KMnO4溶液），讀數(shù)時(shí)可以凹液面兩側(cè)最高處與視線處于同一水平線為準(zhǔn)。最小分度如是0.1mL讀數(shù)時(shí)應(yīng)估讀至0.01mL。

4、滴定管用畢暫時(shí)不再使用時(shí)，應(yīng)洗凈并擦凈活栓，在活栓處應(yīng)墊一紙條，以防粘連。

八凍存管

1、使用凍存管儲(chǔ)存樣本時(shí)，嚴(yán)格要求應(yīng)把凍存管放入液氮的氣相層或冰箱中保存！如果凍存管儲(chǔ)存于液氮液體中，液氮有一定幾率會(huì)滲入凍存管內(nèi)部，復(fù)蘇時(shí)液氮?dú)饣瘜?dǎo)致管內(nèi)外壓力不平衡，這樣極易造成凍存管的炸裂，并具有生物危害性。

2、操作凍存管復(fù)蘇，全程使用安全防護(hù)設(shè)備，建議穿實(shí)驗(yàn)服、戴棉質(zhì)手套且在安全的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行操作。條件允許情況下，請(qǐng)佩戴護(hù)目鏡或防護(hù)面罩。由于夏季室內(nèi)溫度會(huì)高于冬季，請(qǐng)格外小心。

3、凍存細(xì)胞儲(chǔ)存過(guò)程中，凍存管的冷凍溫度須均勻。不均勻的受凍將會(huì)導(dǎo)致冰塞的產(chǎn)生，冰塞會(huì)抑制兩側(cè)的液體溫度傳遞進(jìn)而產(chǎn)生危險(xiǎn)的高壓力并導(dǎo)致凍存管受損。

4、凍存的樣本量不要超過(guò)凍存管要求的最大工作體積。

九比色皿

 1．拿取比色皿時(shí)，只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃，避免接觸光學(xué)面，用力不可過(guò)大。

2．不得將光學(xué)面與硬物或臟物接觸。盛裝溶液時(shí)，高度為比色皿的2/3處即可，光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附，然后再用鏡頭紙或絲綢順著同一方向擦拭。

3．凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液，不得長(zhǎng)期盛放在比色皿中。

4．比色皿在使用后，應(yīng)立即用水沖洗干凈。必要時(shí)可用1：1的鹽酸浸泡，然后用水沖洗干凈。

5．不能將比色皿放在火焰或電爐上進(jìn)行加熱或干燥箱內(nèi)烘烤；

6．在測(cè)量時(shí)如對(duì)比色皿有懷疑，可自行檢測(cè)。可將波長(zhǎng)選擇在實(shí)際使用的波長(zhǎng)上，將一套比色皿都注入蒸餾水，將其中一只的透射比調(diào)至95%（數(shù)顯儀器調(diào)置100%）處，測(cè)量其它各只的透射比，凡透射比之差不大于0.5%即可配套使用。

7、比色皿換向后誤差可達(dá)4％一7％左右。所以在準(zhǔn)確測(cè)量時(shí)；定要看準(zhǔn)比色皿箭頭標(biāo)志。如無(wú)標(biāo)志，可作配套檢定后按方向在毛玻璃上端作上箭頭一致的標(biāo)記。以避免操作時(shí)搞反。

8、比色皿使用時(shí)請(qǐng)勿碰撞。

十定性濾紙

定性濾紙是一種具有良好過(guò)濾性能的紙，定性濾紙紙質(zhì)疏松，對(duì)液體有強(qiáng)烈的吸收性能。分析實(shí)驗(yàn)室常用濾紙作為過(guò)濾介質(zhì)，使溶液與固體分離。

由于定性濾紙的特性，從而實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)院，工廠等各行各業(yè)的一些過(guò)濾都會(huì)用到定性濾紙，也是因?yàn)檫@樣才讓定性濾紙產(chǎn)量直線上升。

定性濾紙?jiān)谶^(guò)濾的過(guò)程中應(yīng)該注意的事項(xiàng),一般情況下,定性濾紙使用都不會(huì)在高溫下進(jìn)行過(guò)濾的,這個(gè)溫度有一個(gè)限度只要不超過(guò)就行了,別外不要過(guò)濾熱的濃硫酸或硝酸溶液熱的酸性可以破壞定性濾紙的過(guò)濾效果.

一般采用自然過(guò)濾，利用濾紙?bào)w和截留固體微粒的能力，使液體和固體分離；

定性濾紙?jiān)谶^(guò)濾機(jī)器中的使用,濾紙的機(jī)械強(qiáng)度和韌性都較盡量少用抽濾的辦法過(guò)濾，如必須加快過(guò)濾速度，為防止穿濾而導(dǎo)致過(guò)濾失敗，在氣泵過(guò)濾時(shí)，可根據(jù)抽力大小在漏斗中疊放2～3層濾紙，在用真空抽濾時(shí)，在漏斗上先墊一層致密濾布，再放濾紙過(guò)濾。